商品詳情:
別稱 DLD 1; DLD1; CoCL3
種屬 人類
年齡(性別) 成人
組織來源 結直腸腺癌上皮細胞
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
背景描述 DLD-1細胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細胞與HCT-15細胞相似,說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。DLD-1細胞和HCT-15細胞的遺傳起源可通過DNA指紋鑒定證實,但染色體組型分析顯示它們缺乏染色體標記一致改變或數目上一致改變。DLD-1細胞的CSAp陰性(CSAp-),p53抗原表達呈陽性(p53抗原產生了一個C→T點突變導致241位的Ser→Phe)。DLD-1細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性,癌基因N-myc的表達未做檢測。DLD-1細胞表達腫瘤特異性核基質蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1細胞代數不明且污染了支原體,其后經過12周多種抗生素聯合培養處理,處理之后每周用Hoechst染色和標準培養法檢測。其后連續11個月不加抗生素培養,DLD-1細胞所有的檢測呈陰性。
生物安全等級 1
生長培養基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~24-48小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 99% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
抗原表達情況 Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re
基因表達情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.
保藏機構 ATCC; CCL-221 BCRC; 60132 DSMZ; ACC-278 ECACC; 90102540

商品屬性:
產品名稱 | DLD-1人結直腸腺癌上皮細胞細胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E2018 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞系培養步驟:
細胞系培養?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養基清洗,棄上清液。加入DMEM培養基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養箱中培養。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養箱中約2-3min。
加入適量DME培養基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養基清洗,棄上清液。加入DMEM培養基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養箱繼續培養。
?細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細胞培養箱中約2-3min。
加入DMEM培養基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養基清洗,棄上清液。加入DMEM培養基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養箱中培養。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養基清洗,棄上清液。加入DMEM培養基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養箱繼續培養。
細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養箱中約2-3min。
加入DMEM培養基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?
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細胞接收后的處理:
1)DLD-1人結直腸腺癌上皮細胞細胞系收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完培養基來培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備MEM培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。