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人原代牙周膜成纖維原代細胞

細胞培養操作：

收貨處理取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養

傳代代數可傳5代左右；3代以內狀態最佳

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法：

1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4.待細胞貼壁后，培養觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：人

組織來源：正常牙組織正常牙組織

生長特性：貼壁生長

產品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰蛋bai酶

產品貨期：3-4周

運輸方式：T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

背景介紹：:牙周膜由致密結締組織所構成，牙周膜內有神經、血管、淋巴和上皮細胞。牙周膜成纖維細胞是牙周膜中最主要的細胞，其功能是參與膠原蛋白的合成與吸收，使牙周膜中的膠原能不斷更新；還與基質形成有關。作為牙周膜的主體細胞,參與了牙周組織的病變、修復及再生過程。現在, 利用牙周膜細胞建立體外模型, 已經成為有關人員研究牙周組織疾病的重要手段。

原代細胞培養的主要步驟包括：

?一、剝離組織，去除外膜、結締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當的緩沖液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后，過濾、計數?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數。

五、?按30萬/毫升分瓶培養?：將計數后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養。

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