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产品名称 | 正常乳腺细胞；Hs578Bst |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63491 |
细胞名称 正常乳腺细胞；Hs578Bst
形态特性: 成纤维细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: Hs578Bst来源于一个浸润性导管癌(Hs578T的起源)旁的正常乳房组织。Hs578Bst可能是肌上皮起源的，因为它有与体内的肌上皮中见到的类似的微丝和丛生的胞饮液泡。未观察到桥粒，没有雌激素受体蛋白，未检测到内生病毒。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清，10%；30ng/mlEGF
传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况: P(10+5)
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
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产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。
rmIL-17F, CF (25 UG)细胞名称: 小鼠淋巴瘤细胞；L-bFGF-5 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIL-17F (25 UG)细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；
CHAPSO；[(胆固氨基)二甲基氨基]-2-羟基-1-磺酸IRS-1 (D23G12) Rabbit mAb1,12-二氨基十二烷
二硫赤藓(D)；1,二硫代赤藓VEGF Receptor 3 (C82A2) Rabbit mAbL-双苄酯对甲磺酸盐
N-硝基-L-甲酯YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb (Biotinylad)1,6-二溴芘
N-甲酰-L-酯(BE)PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAbS-*基-L-半
AEBSF抑制剂PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb(R)-吡咯烷
AEBSF(进分)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-氟-5-甲
盐酸贝他定(进口)Drosha (D30F3) Rabbit mAb9-双环[3.3.1]壬烷
邻菲啰啉盐酸盐，一水MeCP2 (D4F3) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)1,双(2,6-二异基)-4,5-二氢咪唑 四氟酸盐
膦酰二肽钠eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAb2,4,6-三氟甲酸
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAb2-氨基二甲酮
德罗特韦(GSK-1349572,DTG)eIF3H (D9C1) XP® Rabbit mAb2-氨基-酚
十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂酰基喃葡萄糖HIF-1β/ARNT (C15A11) Rabbit mAb氨基-酚
羟基纤维素(20000~30000 mpa.s)Acetyl-Histone H2B (Lys20) (D7O9W) Rabbit mAb酸钠
羟基纤维素(5500-6500 mpa.s)Atg3 Antibody5-氨基-2-溴甲酸
羟基纤维素(40~60 mpa.s)Atg3 Antibody5-氨基-2-甲酸
异基-β-D-硫代半糖苷(IPTG)IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAb氨基-甲氧基甲酸
甘露糖；D-甘露糖IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAb2-氨基-5-酚
D-甘露糖(标准品)CTCF (D1A7) XP® Rabbit mAb甲
N-辛酰基-N-甲基葡糖(MEGA-8)Topoisomerase IIα (D10G9) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)1-氨基-2-甲基-2-
N-癸酰基-N-甲基葡糖(MEGA-10)CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAb3,环氧四
辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAb2-甲基-呋喃硫
D-绵子糖五水；蜜三糖五水Streptavidin (Sepharose® Bead Conjuga)3,(亚甲基二氧)
D-山梨Mouse IgG (Sepharose® Bead Conjuga)氧化环己
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)CNOT2 (D8Z8P) Rabbit mAbN-Boc-1,2,5,6-四氢吡啶-酸频哪酯
L-核糖Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Sepharose® Bead Conjuga)D-阿拉伯糖
L-核糖(标准品)Phospho-HDAC4 (Ser632)/HDAC5 (Ser661)/HDAC7 (Ser486) Antibody十八烷基异酸酯
2-脱氧-L-核糖Phospho-Stathmin (Ser38) Antibody2-甲基基
甲基伞形酮-β-D-木糖苷NCoR1 (E4S4N) Rabbit mAb4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐
2-脱氧-D-核糖Rad50 Antibody邻/对甲磺酸甲酯
D-半糖(标准品)Rad50 Antibody基肼盐酸盐
D-半糖Phospho-53BP1 (Thr543) Antibody三氮唑
盐酸肼;双盐酸肼Phospho-NuMA (Ser395) Antibody6,7-二甲氧基-2,喹唑啉二酮
羟基灰石RhoC (D40E4) Rabbit mAb方酸
羟基纤维素(粘度11250-21000mPas)RhoC (D40E4) Rabbit mAb二异尿酸钠
羟基纤维素Id2 (D39E8) Rabbit mAbFmoc-
羟基纤维素(30000 mpa.s)Cytokine Receptor Common beta-Chain Antibody吡 rmIL-17 RD/SEF, CF (50 UG)细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞；HBKC-48 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
正常乳腺细胞；Hs578Bst人软骨糖蛋白39(HCgp-39)ELISA试剂盒NeuronalChemorepellentSlit2ELISAKit产品规格:48T/96T。
人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒NFELISAKit产品规格:48T/96T。
人胶原吡啶交联(PYD)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。
人脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。
人羟基胶原吡啶交联(OH-PYD)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。
人螺旋肽(HelicalPeptide)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。
人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒NGALELISAKit产品规格:48T/96T。
人基质裂解蛋白(MAT)ELISA试剂盒NGALELISAKit产品规格:48T/96T。
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