777久久精品一区二区三区无码,久久久久免费精品国产,妺妺窝人体色WWW看人体,日韩欧美亚洲国产精品字幕久久久

聯系我們   Contact
搜索   Search
技術文章   Article首頁>>技術文章>>ELISA的基本原理

ELISA的基本原理

點擊次數:1087 更新時間:2016-02-29

ELISA實驗原理      

    用于免疫酶技術的酶有很多,如過氧化物酶,堿性磷酸酯酶,β-D-半乳糖苷酶,葡萄糖氧化酶,碳酸酐酶,乙酰酯酶,6-磷酸葡萄糖脫氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根過氧化物酶,堿性磷酸酯酶等,其中尤以辣根過氧化物酶為多。由于酶摧化的是氧化還原反應,在呈色后須立刻測定,否則空氣中的氧化作用使顏色加深,無法準確地定量。        

    辣根過氧化物酶(HRP)是一種糖蛋白,每個分子含有一個氯化血紅素(protonhemin)區作輔基。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示。氯化血紅素輔基的zui大吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的zui大吸收峰是275nm,所以酶的濃度和純度計算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)=25,式中1%指HRP百分濃度為100ml含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶濃度以 mg/ml 計算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP純度(RZ)=A403nm/A275nm純度RZ(Reinheit Zahl)
值越大說明酶內所含雜質越少。高純度HRP的RZ值在3.0左右,zui高可達3.4。用于ELISA檢測的HRP的RZ值要求在3.0以上。        

ELISA的基本原理有三條:       

(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;      

(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;       

(3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。       

    ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。ELISA

試劑盒

    本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面: 

1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。 

2、研究抗酶抗體的合成。 

3、顯現微量的免疫沉淀反應。 

4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
 

上一篇 ELISA試劑盒容易操作失誤的地方 下一篇 購買elisa試劑盒不得不看的那些事

021-69985169
13611928337

環保在線

推薦收藏該企業網站